Histograma en Contadores Hematológicos Sysmex de 3 poblaciones

PRINCIPIO DE DETECCIÓN

Los contadores hematológicos Sysmex de 3 poblaciones realizan un conteo de las células sanguíneas mediante el método de detección de corriente continua.

La muestra de sangre es aspirada, medida en un volumen predeterminado, diluida en la relación especificada y después es alimentada a cada transductor.
La cámara del transductor tiene un orificio diminuto llamado abertura. En ambos lados de la abertura, existen electrodos entre los cuales fluye corriente continua. Las células de sangre suspendidas en la muestra diluida pasan a través de la abertura, ocasionando que la resistencia de corriente continua cambie entre los electrodos. Conforme cambia la resistencia de corriente continua, el tamaño de la célula de sangre es detectado en forma de pulsos eléctricos.
El conteo de células sanguíneas se calcula mediante el conteo de pulsos, se acota un histograma del tamaño de la célula sanguínea determinando el tamaño de los pulsos. También, al analizar un histograma es posible obtener distintos datos del análisis.

Análisis por impedancia

Método de análisis de hemoglobina sin cianuro

El método de análisis de hemoglobina sin cianuro convierte rápidamente la hemoglobina de sangre como el método de oxihemoglobina y no contiene sustancias tóxicas, lo que lo hace adecuado como método automatizado.
Al ser capaz de analizar la hemoglobina, este método puede analizar de forma precisa la sangre de control, etc. la cual contiene metahemoglobina.

Parámetros del CBC:


Histograma de Leucocitos:
– 1 y 2: Linfocitos en valor absoluto y porcentaje.
– 3 y 4 Población intermedia (MXD) en valor absoluto y porcentaje de Eos, Monos y Basos.
– 5 y 6 Neutrófilos en valor absoluto y porcentaje


Histograma de Eritrocitos:
– RDW: Distribución del tamaño de los hematíes.


Histograma de Plaquetas:
– PDW: Distribución del tamaño de las plaquetas.
– MPV: Volumen Plaquetar Medio
– P-LCR: Porcentaje de plaquetas grandes

INTERVALOS DE NORMALIDAD

ParámetroGrupo de EdadUnidadesUnidadesUnidades SI
WBCAdultos
Niños
Neonato
4-10
hasta 12
hasta 15
x10^3/μLx10^9/L
Linfocitos %Adultos
Niños/Neonatos
25-40
hasta 70
%
MXD %Adultos3 – 13%
Neutrófilos %Adultos50 – 70%
LinfocitosAdultos
Niños
Neonato
1 – 4
hasta 5
hasta 6
x10^3/ μL x10^9/L
MXDAdultos0,2 – 1 x10^3/ μL x10^9/L
NeutrófilosAdultos2 – 7x 10^3/ μL x10^9/L
RBCHombres
Mujeres
4.6 – 6.2
4.6 – 5.4
x10^3/ μLx10^12/ μL
HGBHombres
Mujeres
14 – 18
12 – 16
g/dl8.5 – 11 mmol/L
7.5 – 10 mmol/L
HCTHombres
Mujeres
43 – 49
36 – 46
%0.43 – 0.49 mmol/L
0.36 – 0.46 mmol/L
MCV85 – 95fl
MCH27 – 33pg1.68 – 2.05 fmol
MCHC32 – 36g/dl19.9 – 22.4 mmol/L
RDW-SD37 – 46fl
RDW-CV11 – 16%
PLT150 – 400x10^3/ μLx10^9/L
PDW9 – 14fl
MPV8 – 12fl
P-LCR15 – 35%

HISTOGRAMA DE RBC Y PLT

RBC es determinado como el conteo de partículas entre 2 discriminadores (LD) y (UD) los cuales son contabilizados de forma automática en los intervalos de 25 – 75 fL y 200 – 250 fL, respectivamente. En cuanto al histograma, se realiza la comprobación para los errores de frecuencia relativos en los niveles respectivos del discriminador, para más de un pico y para el error de amplitud de distribución.
Adicionalmente, estos instrumentos son capaces de expresar la amplitud de la distribución RBC (RDW).

  • Las dos curvas de distribución están separadas entre si por un discriminador móvil.
  • Las plaquetas, que tienen un tamaño entre 8 y 12 fl se cuentan en el rango que abarca de los 2 a los 30 fl.
  • Los eritrocitos, que tienen un tamaño entre 80 y 100 fl se cuentan en el rango entre los 25 y los 250 fl.

LD: Lower Discriminator: Discriminador  Inferior.

UD: Upper Discriminator: Discriminador superior.

La curva de distribución de tamaños (histograma), siempre debe de empezar y acabar en la línea base y sus límites han de estar dentro de los discriminadores inferior y superior.

ALARMAS EN EL HISTOGRAMA DE RBC

RL: Altura elevada en el corte de la curva con el discriminador inferior (LD).

La curva no empieza en la línea base

Causas posibles:

  • Plaquetas gigantes.
  • Microhematies.
  • Agregados plaquetares.

Nota: Todos los resultados con alarma deben ser revisados.

RU: Altura elevada en el corte de la curva con el discriminador superior (UD).

La curva no acaba en la línea base.

Causas posibles:

  • Aglutininas frías: Comprobar si MCHC > 40 g/dl.
  • Presencia de eritroblatos / normoblastos.

MP: Multipico.

Causas posibles:

  • Deficiencia de hierro bajo terapia.
  • Anemia asociada a infecciones o tumores.
  • Transfusión sanguínea (hematíes de diferentes tamaños: los propios y los del donante).

DW: Anchura anormal en la distribución de tamaños.

  • Siempre se asume que la altura máxima de la curva es el 100%. El RDW-SD se calcula al 20% de tal altura. Ambos cortes con la curva son necesarios para calcular del RDW-SD.
  • Cuando al 20%, no se produce la intersección de la curva en 2 puntos, se genera esta alarma.
  • Puede indicar extremas anisocitosis o poiquilocitosis extremas.

RDW-CV

El RDW-CV (Amplitud de distribución de RBC – Coeficiente de variación) se calcula con la fórmula de abajo, después de determinar los puntos L1 y L2 para el 68,26% de toda el área de partículas. La unidad aplicada es %.

Se establece en el nivel de frecuencia del 20% con el pico tomado como el 100%. La unidad aplicada es fL (femtolitro = 10^-15 L).

Entre L1 y L2, están el 68,26% de los hematíes de la muestra

Intervalo de normalidad: 11 – 16 %

RDW-SD

Intervalo de normalidad: 37 – 46 fl.

Empieza a tener significado clínico cuando > 60 fl.

ALARMAS EN EL HISTOGRAMA DE PLT

El histograma de plaquetas es analizado usando 3 discriminadores: 2 discriminadores (LD) y (UD) – determinados automáticamente entre 2 – 6 fL y entre 12 – 30 fL, respectivamente – y el discriminador fijo en 12 fL. En cuanto al histograma PLT, se realiza una comprobación para verificar que no existen errores de frecuencia relativos en los discriminadores (LD) y (UD), error de amplitud de distribución y existe un solo pico.

La curva de distribución de tamaños (histograma), siempre debe de empezar y acabar en la línea base y sus límites han de estar dentro de los discriminadores inferior y superior.

PL : Discriminador móvil entre 2 y 6 fl.

PÛ: Discriminador móvil entre 12 y 30 fl.

Un discriminador fijo a 12 fl.

  • MPV: Volumen Plaquetar Medio: Intervalo de normalidad: 8 – 12 fl.
  • P-LCR: Porcentaje de Plaquetas Grandes: Intervalo de normalidad: 15 – 35 %. Valores elevados de este parámetros pueden ser indicativos de :
    • Agregados plaquetares.
    • Plaquetas gigantes.
    • Microhematíes.
  • PDW: Ancho de distribución plaquetar (al 20%, tomando como 100 el pico de la curva): Intervalo de normalidad: 9 – 14 fl. Valores elevados de este parámetros pueden ser indicativos de:
    • Agregados plaquetares.
    • Microhematíes.
    • Fragmentos hemáticos.

PL: Altura elevada en el corte de la curva con el  discriminador inferior (LD).

La curva no empieza en la línea base

Causas posibles:

  • Valor del blanco (recuento de fondo) elevado.
  • Fragmentos celulares.

PU: Altura elevada en el corte de la curva con el  discriminador superior (UD).

La curva no acaba en la línea base

Causas posibles:

  • Agregados plaquetares (incompatibilidad del EDTA, muestra coagulada).
  • Plaquetas gigantes.
  • Microhematíes

MP: Multipico.

Causas posibles:

  • Transfusión de plaquetas.

DW: Anchura anormal en la distribución de tamaños.

Al 20% de la altura de la curva, dónde el pico representa el 100%, no hay intersección en 2 puntos.

ALARMAS EN EL HISTOGRAMA DE LEUCOCITOS

El histograma WBC se discrimina en WBC de tamaño pequeño, medio y grande mediante el método diferencial de 3 partes usando 4 discriminadores. El discriminador INFERIOR (LD) es determinado de forma automática en la posición óptima entre 30 y 60 fL. El discriminador SUPERIOR (UD) se fija en 300 fL, el cual se usa como control para supervisar el error del histograma. Se determinan los puntos bajos del histograma WBC en el intervalo (LD) a (UD); el primero se define a través del discriminador 1 (T1) y el segundo A TRAVÉS del discriminador 2 (T2).

Tras la adición del hemolizante:

  • La curva de distribución debe estar dentro de los dos discriminadores (LD y UD)y debe empezar y acabar en la línea base.
  • El discriminador LD es móvil, pero no puede superar los 30 fl.
  • En el canal de los WBC, se cuentan los leucocitos y las plaquetas que se separan por el discriminador LD. Los RBC son hemolizados, y por lo tanto no se cuentan.
  • El volumen de las plaquetas está entre 8 y 12 fl; por lo tanto, el discriminador LD en el histograma de WBC separa los leucocitos de los trombocitos.

WL: La curva no empieza en la línea base.

Causas posibles:

  • Agregados plaquetares (Incompatibilidad con EDTA o muestra coagulada).
  • Resistencia osmótica de los RBC muy alta (RBC no lisados).
  • Presencia de eritroblastos.
  • Aglutininas frías.

Nota:

Verifique los WBC y todos los parámetros que estén afectados con la alarma .

Diluya la muestra 1:5 para asegurar el recuento total de WBC.

WU: La curva no acaba en la línea base:

La frecuencia relativa para el discriminador SUPERIOR (UD) excede el intervalo. Los casos aplicables son aquellos en los cuales la hemólisis es insuficiente (por ejemplo, muestras cuya membrana RBC tiene una resistencia extremadamente fuerte contra la lisis) o en la cual están presentes numerosas células de sangre anormales.

Verifique los WBC y todos los parámetros que estén afectados con la alarma .

Alarmas T1 y T2:

T1 y T2 son los discriminadores de los valles de las diferentes poblaciones leucocitarias.

  • Estos discriminadores son móviles entre ciertos valores y se ajustan automáticamente a cada muestra .
  • En ciertos casos, la separación entre los valles no será posible y aparecerá la alarma correspondiente al valle que no puede discriminar T1 o T2.

T1: No puede colocarse el discriminador T1: alarma T1 en los resultados.

T2: No puede colocarse el discriminador T2: alarma T2 en los resultados.

  • Confirme los resultados del diferencial leucocitario cuando aparezca alguna de estas alarmas.
  • A pesar de esto, el recuento total de WBC puede asumirse como correcto, siempre que junto a su resultado (el de WBC) no aparezca ninguna otra alarma, ya que se cuentan todos los WBC.

Alarmas F1, F2 y F3.

La curva del histograma está entre los discriminadores inferior y superior (LD y UD).

F1: Linfocitos.

F2: MXD.

F3: Neutrófilos.

  • Si aparece alguna de estas alarmas, el recuento de WBC es correcto, puesto que se cuentan todos. Y siempre que no haya otra alarma en WBC.
  • Se han discriminado bien los valles T1 y T2 pero, la altura de los valles supera un valor preestablecido desde la línea base.
  • Cabe la posibilidad de que las poblaciones hayan sido asignadas de forma errónea.
  • F1 y F2 aparecen conjuntamente, así como F2 y F3.
  • Para obtener el diferencial correcto, se ha revisar la extensión al microscopio.

Alarma AG.

El recuento de partículas iguales o menores que LD excede un intervalo prescrito. La causa probable es la aglutinación de plaquetas, la cual no altera el conteo de WBC pero puede dar como resultado un conteo disminuido de plaquetas. Por lo tanto, este indicador se agrega al parámetro PLT.